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僵蚕两种入药形式下的化学成分溶出性能与抗惊厥作用比较(3)
http://www.100md.com 2018年5月1日 《中国药房》 20189
     2.1.3 蛋白质含量 (1)溶液的制备。样品溶液:精密吸取“2.1.1(1)”项下僵蚕煎液2 mL,以离心半径为4 cm、12 000 r/min离心5 min,分取上清液,将上清液加水定容至100 mL[9],即得僵蚕煎液的样品溶液;同法制得僵蚕粉仿生胃液的样品溶液。空白对照溶液:精密吸取人工胃液30 mL,浓缩至10 mL,精密吸取浓缩液2 mL,在不加入僵蚕的情况下前述方法同法制备空白对照溶液。标准蛋白溶液:取适量牛血清白蛋白(BSA)标准品,用超纯水稀释制成不同质量浓度(0、25、50、100、200、300、400、500 μg/mL)的标准品溶液。(2)线性关系考察。精密吸取上述不同质量浓度的标准品溶液,按BCA试剂盒方法操作,采用酶标仪测定562 nm波长处的吸光度值,以标准品溶液质量浓度为横坐标(x)、吸光度为纵坐标(y)进行线性回归,得回归方程为y=585.76x-80.188(R2=0.991 2)。结果表明,蛋白质质量浓度在0~500 μg/mL范围内线性关系良好。(3)BCA回收试验。精密称取6份已知含量的样品溶液,分别加入一定量200 μg/mL标准品溶液,按照上述操作方法,进行回收试验测定。结果,标准蛋白的平均回收率为99.05%(RSD=1.70%,n=6)。(4)样品中蛋白质含量测定。分别精密吸取“2.1.3(1)”项下样品溶液和空白对照溶液各3份 ......
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