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编号:13604981
基于COⅠ基因的羚羊角及其混伪品的DNA条形码鉴定方法的研究(2)
http://www.100md.com 2018年1月1日 《中国药房》 20181
     1.2 药材与试剂

    共收集4个不同地区的羊角类整角、不完整角样品7个;离心柱型血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(批号:Q5330)、普通DNA产物纯化试剂盒(批号:DP204)均购自天根生化科技有限公司;DL 2000 DNA Marker(100~2 000 bp)(大连宝生物工程有限公司,批号:A1801A);6倍浓度的核酸样品用上样缓冲液[大连宝生物工程(大连)有限公司,批号:A301A];2×Easy Taq SuperMix PCR反应预混液(北京全式金生物技术有限公司,批号:J11122);Gold View I型核酸染色剂、二硫苏糖醇(DTT)、葡聚糖凝胶、三羟甲基氨基甲烷(TRIS)、二水合乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2·2H2O)等均购自北京索来宝生物科技有限公司(批号分别为20160217、20160603、20150902、121750709、308D061)。样品信息详见表1,实物图详见图1。

    2 方法与结果

    2.1 骨塞部位DNA的提取

    2.1.1 脱钙液的制备 称取186.1 g的EDTA-Na2·2H2O,加入800 mL蒸馏水中,磁力搅拌器搅拌,滴管滴加NaOH溶液(1mol/L),用pH计调节pH至8.0,然后用蒸馏水定容至1 L,配成0.5 mol/L的EDTA(pH 8.0)脱钙液 ......
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